一、相对定量测定不同样品中基因表达量的相对值

内参基因的选择对结果的有效性至关重要，以下是选择内参基因应遵循的原则：

(1) 始终选择表达稳定且丰富的基因作为内参基因；

(2) 不要盲目选择常用的内参基因；

(3) 常用的内参基因包括GAPDH、Actin及Tubulin。

在选定内参基因后，将其加入计算中，以获取相对表达量的结果。

二、绝对定量

绝对定量是通过标准品测定样品中基因表达量的绝对值（拷贝数）。标准品可包括：

A. 具有已知拷贝数浓度的样品

B. 克隆质粒

C. PCR产物

D. cDNA（注意：扩增效率测定等用途可以使用，但绝对定量时不能使用）

拷贝数的计算方法如下：

平均分子量（MW）计算：

dsDNA = (碱基数) x (660道尔顿/碱基)

ssDNA = (碱基数) x (330道尔顿/碱基)

ssRNA = (碱基数) x (340道尔顿/碱基)

拷贝数计算公式为：

拷贝数 = (6.02 x 10²³ 拷贝数/摩尔) x (浓度 g/ml) / (MW g/mol) = copies/ml

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