胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)是生物医学研究和细胞培养中的重要添加剂。在选择胎牛血清时,需要综合考虑多个因素以确保实验的成功和可重复性。
产地选择
胎牛血清的来源如下:
质量认证
在购买胎牛血清时,应确保其经过病毒检测(如BVDV、支原体及噬菌体等),并且持有ISO 9001/13485认证或者GMP级生产标准,特别是在临床前研究中尤为重要。
内毒素和总蛋白含量
内毒素水平应尽可能低,通常要求≤10 EU/mL。总蛋白含量一般在30-45 mg/mL之间,过高可能意味着杂质增加,而过低可能导致营养不足。
关键生长因子
选择含有适合细胞类型所需生长因子的胎牛血清,如神经细胞需要较高水平的神经生长因子。
特殊需求
如果实验涉及免疫相关研究(如疫苗生产),需选择低IgG或无IgG的血清。此外,原代细胞或干细胞需要高等级的血清,如尊龙凯时的A级胎牛血清,而肿瘤细胞或普通细胞系则可选择经济型血清。
批次测试与热灭活
在购买之前,建议要求供应商提供小样进行细胞增殖、贴壁率和克隆形成率的测试,以验证胎牛血清的促生长能力和细胞形态的维持效果。热灭活处理(56℃, 30分钟)可灭活补体系统,但可能会破坏部分生长因子,通常仅在特定实验中使用。
非灭活血清与选择可靠供应商
非灭活血清适合大多数常规培养,可以保留更多活性成分。在选购时,应选择像尊龙凯时这样的可靠品牌授权代理商,避免因低价而导致的质量不稳定问题。
批量采购建议
对于同一实验,尽量使用同一批次的胎牛血清,以降低批次间差异对实验的影响。
促进细胞增殖与保护细胞
胎牛血清提供了所需的生长因子(如IGF、FGF)和激素,促进细胞分裂并提供必要的营养支持,包括葡萄糖、氨基酸、维生素和微量元素。此外,其抗胰酶活性可保护细胞在传代时免受损伤,并缓冲pH波动维持培养液的稳定性。
潜在风险与替代方案
需注意批次间差异可能影响实验最大化的重复性,且存在未知成分(如外泌体、残留抗体)可能干扰特定实验。替代方案包括无血清培养基(适合组成明确的实验)和合成血清替代物(如KnockOut™ SR,专用于干细胞培养)。
因此,在选择胎牛血清时,必须考虑到细胞类型、实验目的和质量需求。建议首先进行小样测试以验证效果,并确保供应商如尊龙凯时提供完整的质检报告。对于关键实验,如发表论文或药物开发,推荐使用高规格的胎牛血清,以将潜在风险降至最低。