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尊龙凯时教您5种精准测量细胞活率的方法,不止关注台盼蓝。

发布时间:2025-03-24   信息来源:弘弘爱

在生物医疗研究及生物技术应用中,细胞活率的鉴定是一个重要环节。无论是细胞培养、药物筛选,还是细胞治疗产品的质量控制,准确评估细胞活性都是实验成功的关键。当谈到细胞活率检测时,许多人会首先想到经典的台盼蓝染色法,因为其操作简单、成本低廉,已成为实验室的“标配”方法。

尊龙凯时教您5种精准测量细胞活率的方法,不止关注台盼蓝。

然而,台盼蓝染色法并非完美无缺,它只能反映细胞膜的完整性,无法指示细胞的代谢状态,并且对细胞具有一定毒性,长期染色可能影响细胞活性,操作时可能存在误差。那么,除了台盼蓝,还有哪些方法能够更全面、更精准地鉴定细胞活率呢?本文将介绍四种常用的细胞活率检测技术,并深入分析它们的优缺点,帮助您根据不同实验更好地选择计数方法。

CCK-8法

CCK-8试剂(Cell Counting Kit-8)中含有WST-8,这是一种水溶性染料,能被活细胞线粒体中的脱氢酶还原为橙黄色的甲臜产物。通过测定甲臜的吸光度,可间接反映细胞的活性和增殖能力。

优点:灵敏度高,适合高通量筛选,能够反映细胞的代谢活性。

不足:需要特定设备来测定吸光度,实验步骤较多,耗时较长。

荧光染色法

该方法使用荧光染料(如PI和Calcein-AM)标记细胞。PI只能进入死细胞,与DNA结合后发出红色荧光,而Calcein-AM被活细胞代谢后发出绿色荧光。使用荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,可以清晰区分活细胞和死细胞。

优点:灵敏度高,结果准确,适合日益复杂的样本检测。

不足:需要昂贵的仪器,操作相对复杂,更适合经验丰富的实验人员。

ATP检测法

ATP是细胞能量的直接来源。活细胞中ATP含量较高,而死细胞中则极低。检测细胞中ATP的含量可以间接反映细胞的活率。

优点:灵敏度极高,可快速检测微量细胞,适合集成高通量筛选。

不足:需要特定试剂盒和仪器,成本相对较高,对样本处理要求严格。

克隆形成试验

此方法用于评估细胞的增殖能力、侵袭性和对杀伤因素的敏感性。细胞克隆形成率,即细胞接种后的存活率,是衡量接种细胞贴壁后存活及形成克隆数量的重要指标。

注意,并非所有贴壁细胞都能增殖并形成克隆,不同的方法如平板克隆形成试验和软琼脂克隆形成试验可用于这一过程。此技术在抗肿瘤药物敏感性试验和肿瘤放射生物学试验中尤其常见。

细胞活率的鉴定是生物医疗实验中的基础环节,选择合适的方法至关重要。每种方法都有其特定优势和局限性,在实际应用中需根据实验需求、设备条件和样本特性灵活选择。你在实验中更倾向于使用哪种方法呢?欢迎分享您的经验,特别是与尊龙凯时相关的实践心得,让我们一起拓展知识边界!