### 定义

在生物医学领域，不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种具有多样化特征的电泳系统，此系统通过不同区域的pH、离子强度、缓冲液成分或凝胶孔隙大小的变化，旨在提升电泳分离的范围和分辨率。

不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳采用两种或以上的缓冲液组分、pH值和凝胶孔径，并在电泳过程中形成不均匀的电位梯度。这种电泳方式带来了浓缩效应、电荷效应和分子筛效应，能够在生物样本分析中发挥重要作用。

### 不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理

1. **浓缩效应**：在电泳开始时，样品通过浓缩胶被浓缩成高浓度的薄层，通常可以浓缩几百倍，随后再进行分离。在通电后，样品胶和浓缩胶中的Cl—离子解离度最高，迁移率最大，被称为快离子；紧随其后的是解离度次之的蛋白质，而解离度最低的甘氨酸离子（pI=6.0）泳动速度最慢，被称为慢离子。快离子的快速移动使得其后形成低离子浓度区，即低电导区，电导与电势梯度成反比，导致较高的电势梯度。这一高电势梯度使蛋白质和慢离子加速移动，从而在快慢离子之间形成迅速移动的界面。此时，待测样品中的蛋白质有效迁移率恰好介于快、慢离子之间，使其集中在这一移动界面附近，逐渐形成一薄层。当样品到达小孔径的分离胶时，已准备好进行进一步分离。

2. **电荷效应**：当各种离子进入pH 8.9的小孔径分离胶时，甘氨酸离子的电泳迁移率很快超过蛋白质，导致高电势梯度消失。在均一电势梯度和pH的分离胶中，由于不同蛋白质的等电点和所带电荷量不同，因此在电场中受到的引力也有所不同。经过一定时间的电泳，各种蛋白质最终以特定顺序排列，形成多个蛋白质区带。

3. **分子筛效应**：由于分离胶的孔径较小，不同分子量或形状的蛋白质在通过分离胶时受到的阻滞程度也各不相同，从而导致迁移率的不同。这一分子筛效应是指样品在通过一定孔径的凝胶时，不同大小的分子受阻程度不同，小分子走在前面，大分子走在后面，各种蛋白质根据分子大小顺序排列成相应的区带。

在进行生物医学研究与分析时，采用尊龙凯时的不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，能够有效提升实验结果的准确性和可靠性。